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常规单抗制备套餐

制备方案	服务内容	价格	周期
方案一 从抗原到阳性杂交瘤	内容：抗原检测→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测→融合→筛选→亚克隆→制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；2株阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	20000	4-6月
方案二 从cDNA到阳性杂交瘤	内容：高表达克隆构建→抗原制备与纯化→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测（抗血清内源样本检测）→融合→筛选→亚克隆→克隆上清或腹水内源样本检测→制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；2株阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	25000	4-6月
方案三 从多肽合成到阳性杂交瘤	内容：合成多肽→偶联制备抗原→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测（抗血清内源样本检测）→融合→筛选→亚克隆→克隆上清或腹水内源样本检测→制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；2株阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	22000	4-6月
方案四 小分子化合物单抗制备	内容：客户提供半抗原→偶联制备免疫抗原和检测抗原→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测（对象为检测抗原）→融合→筛选→亚克隆→克隆上清或腹水目的样本检测→制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；2株阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	25000	4-6月
方案五 Elisa配对单抗筛选	内容：客户提供抗原或我们制备抗原→→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测（对象为内源样本）→融合→通量筛选阳性克隆→亚克隆→上清或者腹水检测内源样本实验→上清或者腹水通量配对抗体筛选实验→配对成功克隆制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；配对成功阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；各5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	50000	5-6月
方案六 中和、阻断单抗	内容：通过文献或者自我经验选取功能区域制备抗原（可以多个区域同时选择）→动物免疫（小鼠）→多抗血清Elisa效价检测（对象为内源样本）→融合→筛选→亚克隆→克隆上清或腹水目的样本检测→制备腹水和纯化抗体； 交付：200ul阳性抗血清；2株阳性杂交瘤细胞株；亚型鉴定；5mg纯化抗体（A／G蛋白纯化）；相关检测数据；	40000	5-6月

抗原准备：

 

上海英基生物提供专业的多肽抗原设计算法。多肽抗原路线可同时免疫靶蛋白其中1段、2段或者3段多肽，每段多肽通常为10-20个氨基酸。多肽抗原可由客户您提供或由您委托我们制备，如果您的多肽抗原＜8 kDa，则需要与KLH或其他载体偶联。

 

上海英基生物使用优化的三种Tag蛋白表达系统，来表达抗原全长或者部分肽段（100-500个氨基酸）。我们掌握从包涵体蛋白制备抗体的工艺；如果蛋白可溶表达位于上清，需要蛋白携带His-tag或GST-tag以便于纯化靶抗原。多肽抗原可由客户您提供或由您委托我们制备，如果客户提供，请提供靶蛋白纯度不低于85%，浓度2mg/ml以上，总量10mg左右的蛋白。

 

免疫与抗血清制备：

 

抗原免疫3只小鼠，对免疫后血清进行ELISA 检测；

客户需提供内源蛋白进行westernblot验证，达到客户要求时取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合。

 

克隆筛选：

经过多次筛选获得阳性的单克隆细胞株。如果需要，可选择多个克隆送给客户作进一步检测，客户选定的克隆将会进行亚克隆和扩增培养。

 

大量制备：

 

使用客户选择的克隆进行腹水生产，每个克隆提供10ml以上腹水。

 

抗血清纯化：

 

蛋白A/G纯化：小鼠腹水经蛋白A/G柱，纯化出其中的IgG；

 

最终提供：

 

提供2株以上杂交瘤细胞株，5mg以上蛋白A/G纯化抗体。